ELISA标本如何制备和贮存？

点击次数：2936 发布时间：2018/7/16 23:09:52

检测可溶性蛋白：根据产品说明书制备血清、血浆标本，由于有些样品对温度敏感极易丧失活性，应尽快分离并分装（一般300～500ul/管），大多数标本收集和实验在同一天应贮存在2～8℃。若无法立即测定，应贮存在-70℃，标本贮存时间一般不宜过长，避免反复冻融。使用前将标本平衡至室温，融化标本严禁使用水浴锅。冻存后或冷藏时间过长的标本可能会出现沉淀或小凝集块，应在实验前离心或过滤（0.45um滤膜）标本，体积少的标本不建议过滤。所有标本的收集要使用无菌管，在无菌/半无菌条件下操作防止污染。

血清：将血液在室温凝集10～15分钟，1500g离心20～30分钟，小心吸取血清。

血浆：按试剂盒中的说明书选择抗凝剂。收集血液时，轻轻摇动试管使抗凝剂与血液充分混合。将血液在室温保存 10～15分钟，1500g离心15～20分钟，小心吸上层血浆。

尿液：将尿液收集在无菌的容器内。1500g离心10～15分钟或过滤（0.45um滤膜）去除杂质。注意：对于尿液标本实验的回归系数可能发生变化。

细胞培养上清液：1500g离心10～15分钟去除细胞和细胞残渣。若使用常规典型的培养基，应制备两条标准曲线，一条使用标准品稀释液/或实验缓冲液配制标准品，另一条以细胞培养基配制标准品。若两条标准曲线的变化范围在10%内，实验结果可用任一曲线分析。

检测细胞相关和细胞内蛋白：细胞相关蛋白和其它细胞内蛋白在ELISA实验前需要对标本进行处理将目的蛋白释放出来。

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血清：将血液在室温凝集10～15分钟，1500g离心20～30分钟，小心吸取血清。

血浆：按试剂盒中的说明书选择抗凝剂。收集血液时，轻轻摇动试管使抗凝剂与血液充分混合。将血液在室温保存 10～15分钟，1500g离心15～20分钟，小心吸上层血浆。

尿液：将尿液收集在无菌的容器内。1500g离心10～15分钟或过滤（0.45um滤膜）去除杂质。注意：对于尿液标本实验的回归系数可能发生变化。

检测细胞相关和细胞内蛋白：细胞相关蛋白和其它细胞内蛋白在ELISA实验前需要对标本进行处理将目的蛋白释放出来。

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